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DNA尿素PAGE電泳試劑盒
 產品貨號: RTE4102
 產品名稱: DNA尿素PAGE電泳試劑盒
 產品價格/規格: 10次 600元
 產品說明書: 暫無
 更新時間: 2019-10-18
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  •       DNA尿素PAGE電泳試劑盒(貨號RTE4102  

                              DNA Urea PAGE Electrophoresis Kit

    產品組成:

    貨號

    名稱

    規格

    保存條件

    AC2914-02

    40%PAA(29:1)

    100 ml

    4

    TB001

    5×TBE

    500 ml

    RT

    RU5080

    尿素(電泳級)

    220 g

    RT

    AP020P

    APS(干粉)

    0.5 g

    RT

    (配制后-20貯存)

    TA0761-01

    TEMED

    0.5 ml

    4,避光

    DL050

    2×DNA loading buffer (for 尿素變性膠)

    1 ml

    -20

    產品簡介:

    DNA尿素 PAGE 電泳是研究寡核苷酸電泳的重要研究手段。可以檢測2-500堿基的寡核苷酸片段,理論上可以分辨出相差一個核苷酸的片段。

    本公司提供的DNA尿素PAGE電泳試劑盒包含凝膠制備及電泳所需的全部試劑,用戶只需自備制膠器具和蒸餾水,即可配制各種濃度的PAGE膠,使用方便。

    按照每次制備50 ml 8%凝膠計算,試劑盒可使用10次。

    使用說明:

    一、制備凝膠步驟:

    10% APS配制-5 ml

    將0.5 gAPS干粉溶于5 ml滅菌水中,徹底溶解后分裝,1 ml/支,-20℃備存,每次取一管使用。10% APS應盡量減少室溫存放時間,以防失效。10%APS在4℃有效期為一周,-20℃有效期6個月。若發現凝膠聚合時間延長,應考慮更換使用-20度保存的10% APS。

    1.參照凝膠模具說明書,裝配好凝膠模具。

    2.根據表一,將不同體積的成分混合,漩渦攪拌至尿素徹底溶解。

    表一 配制不同濃度凝膠所需各組分的體積(毫升)

    最佳片段分離范圍

    凝膠濃度

    尿素(克)

    40%PAA

    29:1ml

    5×TBE

    ml

    補水到總體積

    70-300 nt

    5%

    21

    6.25

    10

    50 ml

    45-70 nt

    6%

    21

    7.5

    10

    50 ml

    35-45 nt

    8%

    21

    10

    10

    50 ml

    25-35 nt

    10%

    21

    12.5

    210

    50 ml

    3. 加入50 μl TEMED,立即混勻。

    4. 加入0.5 ml 10% APS,立即混勻。

    5.在凝膠模具中灌入適量凝膠溶液,在膠的液面距離達到頂部時停止灌膠,插入梳子;常溫靜置30-60分鐘。

    注: 凝膠的聚合時間與環境溫度有關。夏天溫度較高時,聚合較快;冬天氣溫低時,聚合時間會延長。可以根據環境溫度的不同調節APS的加入量。

    6. 拔出梳子,用1×TEB液沖洗加樣孔。

    二、電泳:

    7. 預電泳:穩壓5V/cm 預電泳30min。

    8.  取 3-5 μl樣品,加入等體積2×DNA loading buffer (for 尿素變性膠),95℃處理5 分鐘后冰浴,上樣。

    9.  連接電源線,打開電源開關。按照5V/cm 電壓電泳。

    10.  終止電泳,取出凝膠進行后續的處理(如銀染) 。


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