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細菌蛋白提取試劑盒
 產品貨號: RTD8101
 產品名稱: 細菌蛋白提取試劑盒
 產品價格/規格: 100次 400元
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 更新時間: 2019-10-18
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  • 細菌蛋白提取試劑盒(100次)  貨號:RTD8101

    產品組份及規格

    產品編號

    名稱

    規格

    貯存

    運輸

    RTD8101-01

    細菌蛋白提取緩沖液

    100 ml

    4

    常溫

    PM1790

    100 mM PMSF100×

    10 ml

    RT

    (配制后-20℃

    常溫

    RTD8101-03

    溶菌酶(50mg/ml

    1 ml

    -20℃

    濕冰

    RTD8101-04

    DNase I1000U/ml

    100 μl

    -20℃

    濕冰

    產品簡介

    細菌蛋白提取試劑盒使用溫和的非離子型去污劑,適用于大腸桿菌表達的重組蛋白提取。提取過程中不需進行超聲破碎等復雜的操作步驟,有效避免了外源蛋白的污染。該試劑盒在抽提試劑的基礎上添加了溶菌酶、DNaseⅠ和蛋白酶抑制劑PMSF,可提高蛋白提取效率并減輕因DNA引起的粘稠現象,有效避免蛋白降解。所提取的蛋白保持了生物學活性,可進行IP、Western blot實驗;提取體系中不含EDTA,可直接通過Ni-NTA 等純化填料進行蛋白純化。該試劑盒既可適用于小量蛋白表達檢測,也適用于大量蛋白的表達純化試驗。

    每次提取使用1ml 緩沖液計算,該試劑盒可以使用100次。

    ●    貯存條件:

    試劑組份按照溫度貯存,可保存 12個月。

    ●    使用方法:

    1. 8,000 rpm常溫離心 3 min 后,棄上清,盡量棄除殘余培養基,留取管底部菌體。

    2. 即用型提取緩沖液配制:每ml 提取緩沖液中加入10 μl PMSF,10 μl 溶菌酶,1 μl DNase I,混勻后4℃貯存備用。注:該緩沖液現用現配,不建議貯存。

    3. 按照原菌液1/2-1/5體積加入即用型提取緩沖液,即2-5 ml菌液收集的菌體加入1 ml 提取緩沖液,用吸頭吹打至無可見細胞團塊,重懸菌體。

    4. 20-37孵育 15-20 min,期間輕彈離心管數次以加速裂解。

    注:若蛋白表達量較低,建議結合超聲破碎,置冰上后,采用300w,10s 超聲/10s 間隔,超聲20min,至菌液變清亮。

    5. 裂解完成后 13,000rpm4℃離心5 min,將上清(上清中即為可溶性蛋白)轉移至新的離心管中,直接進行下一步純化或檢測實驗。

    6. 蛋白提取物分裝后建議-80℃保存。



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