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DAB顯色試劑盒
 產品貨號: DA0430S
 產品名稱: DAB顯色試劑盒
 產品價格/規格: 100ml 200元
 產品說明書: 點擊查看
 更新時間: 2020-01-16
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  • DAB顯色試劑盒(DAB Color Development Kit)

    產品編號

    產品名稱

    包裝

    DA0430S-01

    DAB顯色液A

    50 ml

    DA0430S-02

    DAB顯色液B

    50 ml

    -

    說明書

    一份

    ●       產品簡介:

    DAB顯色試劑盒(DAB Color Development Kit)是一種借助辣根過氧化物酶(HRP),用于免疫組化顯色、原位雜交顯色或Western、Southern、Northern、EMSA等膜顯色的試劑盒。 DAB,即3,3-N-Diaminobenzidine Tertrahydrochloride,是辣根過氧化物酶的常用底物。在辣根過氧化物酶的催化下,DAB會產生棕色沉淀。該棕色沉淀不溶于水和乙醇。因此在DAB顯色后,還可以使用溶于乙醇的染料進行后續染色。

    本試劑盒可以用于細胞或組織在免疫組化或原位雜交時結合的辣根過氧化物酶顯色,也可以用于Western等結合有辣根過氧化物酶的膜的顯色檢測。同時也可以用于細胞或組織內源性的辣根過氧化物酶顯色。

    用于免疫組化或原位雜交時,如果每個片子使用0.2毫升顯色液,那么本試劑盒共可以檢測500個片子。  

    ● 保存條件:

    -20oC保存,一年有效。DAB顯色液A和DAB顯色液B均需避光保存

    ● 使用說明:

    1. 對于組織切片或蛋白質印跡膜,在與辣根過氧化物酶(HRP)標記的抗體或其它形式的探針孵育后,用適當洗滌液洗滌 3-5 次,每次 3-5 分鐘。

    2. 取顯色液A和顯色液B等體積混合均勻,即配成 DAB 染色工作液。此溶液必須現用現配,配好后避光保存,1 小時內使用,過期后請將剩余的液體廢棄。

    3. 向組織切片或膜上加入適量 DAB 染色工作液,確保能充分覆蓋樣品。 

    4. 常溫避光孵育 3-10 分鐘或更長時間,避免光照,直至顯色至預期深淺。 

    5. 去除 DAB 染色工作液,用蒸餾水洗滌 2-3 次即可終止顯色反應。 

    6. 對于組織切片或細胞樣品,顯色反應終止后,可對其進行其他染料復染。對于膜,顯色反應終止后,可以室溫晾干避光保存。

    常見問題:

    一. 背景顯色太深。

    1. 如果背景顯色太深,一方面需考慮使用適當的封閉液進行封閉,例如選購適當的封閉液或使用和一抗相同來源的血清(10%)進行封閉。另一方面,請選購經過適當吸附的二抗,以減小二抗的非特異性吸附。

    2. 可以考慮縮短顯色時間,或降低二抗濃度。另外,選擇適當強度的洗滌液,或延長洗滌時間也會有所幫助。

    二. 沒有顯色或顯色太弱。

     1. 適當提高一抗或二抗的濃度。在離心管內用稀釋的二抗與染色液反應,檢測二抗是否可以被正常顯色。 

    2. 可以考慮使用更加靈敏的放大檢測體系,例如使用生物素檢測體系。

    3. 可以適當延長顯色時間。


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